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食品中維生素D的測定GB 5009.296-2023標準解讀

更新時間:2024-09-23      點擊次數:2447

         標準GB 5009.296-2023的前身是GB 5009.82-2016,現在食品中維生素A、E繼續使用標準GB 5009.82-2016,維生素D單獨實行標準GB 5009.296-2023。本文將重點介紹GB 5009.296-2023標準中3個方法實驗中的注意要點,與大家分享與交流。

        在方法解讀之前,可以先了解下維生素D來源和性質,在后續實驗中才能更好的提取目標物。


一、維生素D的來源:

 image.png

 

二、維生素A、D、E性質

維生素

氧化性

酸性

堿性

金屬離子

光照

加熱

維A醇

不穩定

不穩定

穩定

不穩定

不穩定

穩定

維生素D2

不穩定

不穩定

較穩定

不穩定

不穩定

穩定

維生素D3

不穩定

不穩定

較穩定

不穩定

較不穩定

不穩定

維生素E

不穩定

穩定

較穩定

不穩定

不穩定

穩定

 






三、第一法 正相色譜凈化-反相液相色譜法的注意要點

1、取樣量嚴格按照標準的不同基質的取樣量,因為干法工藝,取樣量少會影響均勻性。

2、上機前,為了保護正向硅膠柱,提取液水洗后,必須用無水硫酸鎂鈉粉末脫水至無水狀態。

3、為保證儀器靈敏度,正向色譜進樣量:500μL;反相色譜進樣量:100μL;

4、濃縮時,大體積石油醚待濃縮液,可選用萊奧12位全自動氮吹濃縮儀,可支持自動定容到1ml,再氮吹到近干;大體積氮吹時,實驗員可解放雙手,無需值守,并且確保氮吹不會吹到干。防止維生素D附著壁上,影響回收率。

img1 

Leowlab SmartVap N12

萊奧12位全自動定量濃縮儀

5、內標法和外標法的選擇?首先確定樣品是否含有維生素D2和D3.

 

四、第二法 在線柱切換-反相液相色譜法的注意要點

1、關注儀器靈敏度問題,根據取樣量、定容體積、進樣量、檢測器靈敏度、檢出限綜合考慮。

2、固相萃取柱填料可選HLB,重點要保證較大的柱容量,耐堿性、耐壓性,由于樣液皂化條件是堿性的,待凈化液屬于堿性。

3、標準提到的奶粉、油脂含量高的肉類、粘稠的蜂蠟等制品屬于復雜類基質,需要過柱壓力較大,選用萊奧48位正壓固相萃取儀,針對以上復雜基質,壓力相比真空泵負壓裝置,最高可達100psi,可以輕松快速過柱。

4、固相萃取可選擇萊奧48位正壓固相萃取儀,可取代實驗室常用的真空泵負壓萃取裝置,能大大縮短萃取時間,提高萃取效率,達到很好的平行性及回收率。

 

透明底48.png

Leowlab Purifier A48

萊奧48位正壓固相萃取儀

img3 

5、固相萃取儀后的液體,加入適量水,主要是克服色譜溶劑效應,改善峰型;

6、一維色譜柱可選用 PFP(五氟苯基)填料,在同時分離生育酚異構體時使用。

7、二維色譜柱可選PAH(多環芳烴)或固醇類分析C18柱。

8、捕集取柱可選C18或C8,粒徑可采用10μm填料,柱長可選用到30mm

 

五、第三法 液相色譜-串聯質譜法的注意要點

1、選擇硅膠基質的固相萃取柱,需要注意防水,活化則選擇有機溶劑進行活化。

2、同位素內標的選擇:維生素 D2-d3、和維生素 D3-d3;,也可使用維生素D2-d6。和維生素 D3;-d6。可綜合考慮成本;

3.質譜檢測的離子化效率的評估實驗必須開展,對于不同的基質,樣品是不一樣的。

4.質控樣品的跟進是必要的,才能驗證做的樣本結果的準確性。

5、標準提到的奶粉、油脂含量高的肉類、粘稠的蜂蠟等制品屬于復雜類基質,需要過柱壓力較大,選用萊奧48位正壓固相萃取儀,針對以上復雜基質,壓力相比真空泵負壓裝置,最高可達100psi,可以輕松快速過柱。

 透明底48.png

Leowlab Purifier A48

萊奧48位正壓固相萃取儀

六、關于我們

img5 

氮氣發生器

img6 

正壓固相萃取儀&氮吹儀

 

廣州萊奧實驗室科技有限公司總部位于廣州,是一家專注于有機質譜供氣及前處理儀器的高科技企業。

團隊人員擁有十幾年的質譜儀、前處理儀器、氮氣發生器從業經歷。公司服務于全國食品、制藥、臨床檢驗、環境、司法鑒定、科研院所等行業。

 


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